李星佑出生于湖北省省武汉市；2003年,进入武汉市艺术学校歌舞班就读。2009年,李星佑在艺术高考的专业考试中,以第2名的成绩被北京舞蹈学院音乐剧系录取；大学毕业后,李星佑去了孟京辉工作室,他在话剧舞台上磨练了四年,并出演了多部舞台剧。
《游泳先生》剧照2011年5月,参演孟京辉执导的话剧《希特勒的肚子》,从而正式出道。2012年4月,主演的话剧《混小子狂欢节》在国话东方先锋剧场首演,李星佑在剧中饰演粗暴狂野的“混小子”。2014年,主演励志音乐剧《沫若少年》,李星佑在剧中饰演少年时代的郭沫若。2015年,加盟真人秀节目《恶作俱乐部》。2016年1月23日,出演的青春爱情剧《翡翠恋人》在上海开机,李星佑在剧中饰演帅萌的温暖军官雷小火,这也是他的首部电视剧作品；6月26日,主演的古装悬疑网络电影《明侦探渣男》开机,李星佑在片中饰演朝廷急命东厂新人查小男；11月21日,与罗云熙,刘馨棋合作出演的古装奇幻网剧《屏里狐》在搜狐视频播出,李星佑在剧中饰演富家公子哥张启鸣。2017年1月5日,主演的古装悬疑推理电影《十八盗之云中鹤》上映,在片中饰演邋遢蠢笨卖黄酒的孙黄酒。2018年9月5日,与鞠婧祎,Mike合作主演的都市青春剧《游泳先生》在芒果TV播出,李星佑在剧中饰演游泳运动员姜世。2022年3月,李星佑参演古装网剧《我家侯爷不宠我之欢喜冤家》。《屏里狐》剧照《翡翠恋人》剧照个人写真
李星佑写真李星佑通过多年话剧表演的历练,打下了扎实的戏剧表演功底。在电视剧《翡翠恋人》中,李星佑相较于其他同龄的90后演员,展现了其丰富的表演经验,独特的个性以及很强的可塑性。在《屏里狐》,《十八道之云中鹤》等影视作品中,李星佑凭借其出色的角色塑造能力,在获得充分观众认可度的基础上,也为他在诠释剧中人物时设计了更多的小细节,并增加了他的信心。此外,李星佑身穿混搭西装,还展现了其痞帅的个性。